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（LOW-INPUT, ULTRA-DEEP, ULTRA-SENSITIVE）
海普洛斯自主的分子技术涵盖湿实验室NGS工作流程中的所有主要步骤，以实现高产量、高质量的核酸分离及测序文库构建，同时最大限度地减少测序错误。
01
CUBE-ctDNA
CUBE-ctDNA是海普洛斯自主开发的单分子编码技术，用于提高超高深度测序的信噪比。在测序文库制备过程中，该技术在每个双链DNA分子模板两端分配两个单分子条形码（UMI）。基于该UMI，每个测序序列均可追溯至原始DNA模板分子。真阳性突变会出现在同一UMI的绝大多数测序序列中，而PCR扩增或测序错误引入的假阳性突变，则仅出现在小部分同一UMI的测序序列中。此外，通过双链DNA中的序列互补特性，可进一步过滤原始双链DNA分子中的单链假阳性突变。
在性能分析验证中，通过CUBE-ctDNA技术，可有效将NGS背景噪音从行业平均水平的0.1%降低到0.00058%。借此海普洛斯可将ctDNA检测限降低至0.005%水平。
在性能验证研究中，与某国际分子诊断公司的cfDNA提取试剂相比，Effentration®有更高的cfDNA分离效率及更高的平均测序深度。
02
Effentration®
DNA提取是NGS突变检测的第一个关键步骤，海普洛斯专门开发了有效的cfDNA提取技术-Effentration®，通过构建拥有自主配方的裂解液、结合液和洗涤液体系，可有效富集低丰度的cfDNA。
03
HAPCap®
在文库制备过程中，需要对原始DNA模板进行PCR扩增。通常ctDNA在cfDNA中占比很少，而PCR扩增偏好性会降低ctDNA被检测到的可能性。为解决此问题，海普洛斯开发了HAPCap®。如图所示，HAPCap®通过乳液PCR技术，使模板DNA分子在物理分离的微量油包水液滴中扩增，从而有效捕获了低丰度ctDNA，提高了ctDNA突变检测灵敏度。
HAPCap®技术流程图
